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產(chǎn)品中心

  • NCI-H838人非小細胞肺癌細胞

    規(guī)格:
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    • 品牌 :
    • 目錄號 : TW29448
    • 應用 : 僅供科研使用
    • 貨期 : 現(xiàn)貨
    • 規(guī)格 :株
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上海通蔚公司匯集了一批專業(yè)的細胞生物學技術(shù)人員,所有細胞入庫之前均經(jīng)過嚴格的細胞質(zhì)量檢測和鑒定,所有細胞在出庫之前均經(jīng)過一次嚴格的質(zhì)檢認證,確保細胞到每一位用戶手里都是最好狀態(tài)。


NCI-H838人非小細胞肺癌細胞

RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
細胞生長:貼壁生長
細胞形態(tài):上皮樣
細胞數(shù)量:1×106個細胞數(shù)
細胞傳代:1:3傳代
細胞特性:該細胞于1984年建系源于一位59歲患有非小細胞肺癌的白人男性吸煙者從患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶分離而來
細胞純度:95%
細胞活力:87%(ViabilitybyTrypanBlueExclusion)
細胞檢測:細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌
細胞凍存:液氮凍存(基礎培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS)
細胞運輸:干冰運輸(1Vial)或活細胞運輸(T-25flasks)
細胞用途:只可用于科研不可用于臨床診斷和治療


胞培養(yǎng)條件:

1、培養(yǎng)基:RPMI-1640培養(yǎng)基(不含Hepes)+ 10%胎牛血清+ 1%雙抗+800ng/ml Taxol
2、溫度:37.0°C
3、氣體:空氣 95%,CO2 5%


培養(yǎng)方法:

收到細胞后,在倒置顯微鏡下觀察整個細胞生長情況:
如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶,留10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
如果細胞已長滿(達80-90%)。即可進行傳代,具體步驟如下:
a,棄去培養(yǎng)液,用PBS洗1-2次。
b,向瓶內(nèi)加入1.0-2.0ml胰蛋白酶液,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓,迅速拿回操作臺,吸取胰蛋白酶,加含有6ml 含10%血清的培養(yǎng)液,輕輕吹打細胞。
c,加入等量的的培養(yǎng)液,輕輕吹打混勻后吸出一半,分到新的培養(yǎng)
d,傳代比例:1:2-1:3


溫馨提示:培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)液是加入最高藥物濃度的,為800ng/ml。我們采取緩慢增加藥物的梯度的方法。具體步驟是,首先加含200ng/mlTaxol藥物的培養(yǎng)液,放入培養(yǎng)箱,這段時間會有小部分細胞懸浮起來,屬于正常情況,通過換液可以去掉,等細胞待長滿就可以消化傳代了,這時可以一直用含藥物培養(yǎng)液來消化培養(yǎng)細胞,一兩代之后就可以將藥物濃度提高到500ng/ml,兩代后可以將藥物濃度提高至最高水平800ng/ml,含藥物培養(yǎng)液用于細胞培養(yǎng)都沒有問題,凍存的時候就不要在凍存液里加藥物了。


保存和應用:

客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。


復蘇的原則:

在實際操作中,凍存細胞要進行復蘇,再培養(yǎng)傳代。復蘇細胞一般采用快速融化法。以保證細胞外結(jié)晶快速融化,以避免慢速融化水分滲入細胞內(nèi),再次形成胞內(nèi)結(jié)晶損傷細胞。


如何購優(yōu)質(zhì)的

NCI-H838人非小細胞肺癌細胞

1)該細胞只能用于科研,不得用于臨床應用。
2)收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
3)仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等。
4)用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常,請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細胞無活力,請拍下照片及時和我們聯(lián)系,信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
5)請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細胞逐漸適應培養(yǎng)條件;建議直接購買我司提供的完全培養(yǎng)基。
6)建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。


售后服務:

1)發(fā)貨時附:細胞實拍圖片兩張、細胞培養(yǎng)說明、細胞操作處理方法、細胞質(zhì)量問題反饋表等。
2)細胞污染問題,請在收到產(chǎn)品48小時內(nèi)給我們真實的實驗結(jié)果;細胞活性問題,請在收到產(chǎn)品7天內(nèi)給我們真實的實驗結(jié)果,我們調(diào)查核實后予免費調(diào)換,不收取任何費用。
3)如用戶收到細胞8-15天之內(nèi)因處理不當造成細胞死亡或污染,我公司將以6.5折優(yōu)惠價重新提供一株原細胞。
4)如用戶在16-30天內(nèi)因處理不當造成細胞死亡或污染,我公司將以8折優(yōu)惠價重新提供一株原細胞。

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