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021-54845833/15800441009
基本信息
產(chǎn)品品牌 ：通蔚生物
中文名稱 ：小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞
細(xì)胞簡稱 ： bEnd.3[BEN D 3]
細(xì)胞形態(tài) ： 上皮細(xì)胞樣
生長特性 ： 貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)環(huán)境 ： 空氣，95% 。CO2，5% 37℃
凍存條件 ： 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40% FBS+5% D M SO液氮
完全培養(yǎng)基 ： DM EM (PM 150210)＋10% F B S(164210-50)＋1% P /S(P B 180120)
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液。
2、加入2ml左右PBS，輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄。
3、加入1ml左右0.25% 胰蛋白酶溶液（含ED TA ），輕輕晃動培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細(xì)胞。
4、放入培養(yǎng)箱消化，顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯變圓有間隙時可終止，全程不要拍打培養(yǎng)瓶。
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液。
6、收集細(xì)胞懸液離心，1200rpm /min 3分鐘，離心完吸出上清丟棄。
7、加入新鮮培養(yǎng)基，吹打幾下混勻細(xì)胞即可，按比例接種到新培養(yǎng)瓶，補足培養(yǎng)基，擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進(jìn)行培養(yǎng)。
消化時間 ： 2~ 3分鐘
傳代比例（密度） ： 1:2-1:4
換液頻次 ： 2~ 3次/周
細(xì)胞背景描述
The cellsw ere transform ed byin fection withtheNTKm Tretro virus vecto r thatexp resses p olyom avirusmiddleT antigen
供體年齡 ： 6周齡
組織來源 ： 大腦皮層
細(xì)胞類型 ： 轉(zhuǎn)化細(xì)胞系
生物安全等級 ： 1
抗原表達(dá) ： ICAM -1+;VCAM -1+;M AdCAM -1+
基因表達(dá) ： von Willebrand factor,ICAM -1+;VCAM -1+;M AdCAM -1+,Theendothelialnature ofthese cellsw asconfirm ed by the observed expression ofvon Willebrand factorand uptake offlu o rescen tlylabeledlow densitylipoprotein (LD L).,T he expression ofPeyer'sPatch high endothelialreceptor forlym phocytes,them ucosalvascular ad d ressin(M AdCAM -1)and E-selectin can beinduced on bEnd
細(xì)胞保藏中心 ： ATCC ; C RL-2299 BC RC ; 60515EC A C C ; 96091929
收到常溫細(xì)胞后如何處理
細(xì)胞培養(yǎng)詳細(xì)操作步驟請參照通蔚生物細(xì)胞培養(yǎng)操作指南
1.收到常溫細(xì)胞后，及時拍照記錄有無漏液/瓶身破損現(xiàn)象。
2.用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3.仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4.靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片 將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5.若觀察到異常或者對細(xì)胞有疑問，請及時跟我們聯(lián)系。對于細(xì)胞培養(yǎng)操作及培養(yǎng)。可跟我們的技術(shù)支持交流。
售前須知
1. 該細(xì)胞在低密度下形態(tài)不規(guī)則，細(xì)胞數(shù)量少，鋪展面積大，高密度后形態(tài)會趨于一致，胞體密集。
2.細(xì)胞增殖偏慢，初次傳代建議1：2，細(xì)胞穩(wěn)定后建議傳代比例也不超過1：4。
3. 注意觀察培養(yǎng)基顏色，顏色偏紫會導(dǎo)致細(xì)胞漂浮增加。
4. 消化時間會隨著細(xì)胞生長時間和細(xì)胞密度而有所不同，需要結(jié)合消化時細(xì)胞狀態(tài)來判斷，消化到細(xì)胞可以滑落方可終止。
