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產(chǎn)品中心

  • 大鼠精原干細胞

    規(guī)格:
    價格:
    • 品牌 : 通蔚生物
    • 目錄號 : TW33622
    • 應用 : 僅供科研使用
    • 貨期 : 現(xiàn)貨
    • 規(guī)格 :5×10?Cells
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產(chǎn)品簡介
產(chǎn)品名稱 : 大鼠精原干細胞
產(chǎn)品品牌 : 通蔚生物
組織來源 : 睪丸組織
產(chǎn)品規(guī)格 : 5×105cells/T 25細胞培養(yǎng)瓶

細胞簡介
大鼠精原干細胞分離自睪丸組織;精原干細胞是位于睪丸生精小管的生精上皮內(nèi)的一群生精干細胞,是成體內(nèi)的定向干細胞。精原干細胞的一些獨特優(yōu)勢使其成為動物轉基因的理想宿主細胞。精原干細胞的生理生化特性及其分裂增殖、分化等多項生命活動的調(diào)節(jié)機制的深入研究,精子發(fā)生機理的進一步闡明以及精原干細胞轉染,異體、異種移植技術的實際應用,都迫切需要找到一種可行的方法將其分離純化,以期得到較高產(chǎn)量和純度的有活力的精原細胞用于體外培養(yǎng)。在哺乳動睪丸內(nèi),精子發(fā)生時一個受高度調(diào)控和持續(xù)的過程,精原干細胞(SSC s)一方面進行自我更新維持干細胞數(shù)量,另一方面又不斷執(zhí)行分化成各級生精細胞直至最后生成精子。

精原干細胞定居在曲精細管上皮的基膜處,是哺乳動物精子發(fā)生的最原始細胞,也是動物體內(nèi)一起能將遺傳信息傳遞的干細胞。精原干細胞體外培養(yǎng)體系的建立,在生物學、醫(yī)學、畜牧業(yè)生產(chǎn)及制備轉基因動物等領域具有廣闊的應用前景。精原干細胞(SSC s)是生精上皮近基底膜的一群細胞,具有自我更新能力和多向分化潛能,是哺乳動物體內(nèi)唯一能將遺傳信息傳遞給下一代的成體干細胞。

方法簡介
通蔚生物實驗室分離的大鼠精原干細胞采用先機械吹打、后胰蛋白酶消化,結合P ercoll密度梯度離心法制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶。

質(zhì)量檢測
通蔚生物實驗室分離的大鼠精原干細胞經(jīng)c-kit免疫熒光鑒定,純度可達90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息
培 養(yǎng)  基 :含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長特性 :貼壁 
細胞形態(tài) :梭形、圓形
傳代特性 :可傳1-2代 
傳代比例 :1:2
消 化  液 :0.25% 胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 :氣相:空氣,95% ;C O2,5%
大鼠精原干細胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用通蔚生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

細胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片

使用方法
大鼠精原干細胞是一種貼壁細胞,細胞形態(tài)呈梭形、圓形,在通蔚生物技術部標準操作流程下,細胞可傳1-2代;建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出T 25細胞培養(yǎng)瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養(yǎng)瓶中,輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5m L,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
3. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗;包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1m g/m l),明膠(0.1% ),依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。

注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和通蔚生物技術部溝通。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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